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基因編輯技術(shù)

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基因編輯技術(shù)

基因編輯技術(shù)范文第1篇

早在1987 年,CRISPR序列由日本科學(xué)家在大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)[1],但由于這段序列的功能無(wú)法確定,因此該發(fā)現(xiàn)一直未引起人們的注意,隨后,研究人員研究發(fā)現(xiàn)這種間隔重復(fù)序列廣泛存在于細(xì)菌和古細(xì)菌的基因組中,隨著人們對(duì)該結(jié)構(gòu)的逐漸了解,2002 年,這種結(jié)構(gòu)被正式定義為CRISPR。2005 年,研究人員發(fā)現(xiàn)CRISPR的間隔序列可以識(shí)別并結(jié)合特定的噬菌體DNA 序列,從而使得CRISPR序列在獲得性免疫中發(fā)揮作用。2008 年,Marraffini 等[2]發(fā)現(xiàn)細(xì)菌CRISPR 系統(tǒng)能夠阻止外源質(zhì)粒的轉(zhuǎn)移,并首次利用實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了CRISPR 系統(tǒng)的功能,科學(xué)家們也由此揭開(kāi)了研究CRISPR 系統(tǒng)作用機(jī)制的序幕。

1 CRISPR的結(jié)構(gòu)與分類(lèi)

CRISPR 作為一種特殊DNA 重復(fù)序列,主要由多段長(zhǎng)度為25 50 bp 長(zhǎng)度的高度保守重復(fù)序列和26 72 bp 長(zhǎng)度的間隔序列串聯(lián)而成。同一個(gè)CRISPR位點(diǎn)中的重復(fù)序列一般具有極高的保守性,5’端與3’端部分尤為保守,但在微生物種間甚至同一個(gè)基因組的不同CRISPR位點(diǎn)間卻存在較大的差異。另外,不同的CRISPR位點(diǎn),其包含的間隔序列的數(shù)量差別也很大,從幾個(gè)到幾百個(gè)不等。

CRISPR/Cas 系統(tǒng)大體上可以分為3大類(lèi)型:Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型。其中,Ⅰ型和Ⅲ型在介導(dǎo)外源DNA 降解過(guò)程中需要多種Cas 蛋白來(lái)參與反應(yīng),形成的切割復(fù)合體結(jié)構(gòu)復(fù)雜,Ⅱ型系統(tǒng)組分則較為簡(jiǎn)單,只需要一個(gè)Cas9 蛋白來(lái)切割DNA 雙鏈。一個(gè)簡(jiǎn)易的Ⅱ型CRISPR/Cas 系統(tǒng)必定要含有g(shù)RNA 和Cas9,Cas9 蛋白具有改造crRNA 和破壞雙鏈DNA 的雙重功能,位于gRNA 5' 端的20 bp左右的堿基決定CRISPR/Cas9 系統(tǒng)在應(yīng)用時(shí)Cas9核酸酶特異性切割的位點(diǎn),主要負(fù)責(zé)決定CRISPR/Cas9 系統(tǒng)的特異性。目前以Ⅱ型CRISPR 系統(tǒng)為基礎(chǔ)的CRISPR/Cas9 系統(tǒng)在基因組編輯中有較為廣泛的應(yīng)用。

2 CRISPR/Cas9的作用機(jī)理

CRISPR/Cas9 基因組編輯技術(shù)的基本原理為,將tracrRNA: crRNA 設(shè)計(jì)為引導(dǎo)RNA(gRNA),gRNA 包含位于5’端靶DNA 的互補(bǔ)序列以及位于3’端tracrRNA: crRNA 的似序列,利用靶DNA 的互補(bǔ)序列來(lái)定位需要編輯的位點(diǎn),利用該類(lèi)似序列與Cas9進(jìn)行結(jié)合。該技術(shù)僅設(shè)計(jì)引導(dǎo)RNA 即可實(shí)現(xiàn)對(duì)含有PAM 序列的任一靶DNA序列進(jìn)行插入、敲除與定點(diǎn)突變等修飾。由于設(shè)計(jì)操作簡(jiǎn)單、通用性好及編輯效率高等優(yōu)勢(shì),CRISPR/Cas9 的基因編輯技術(shù)已成為T(mén)ALEN 與ZFN之后的新一代基因組編輯技術(shù)。

另外,CRISPR/Cas9 系統(tǒng)還可以實(shí)現(xiàn)同時(shí)對(duì)多個(gè)不同靶DNA 序列進(jìn)行編輯。利用CRISPR 位點(diǎn)自身的特點(diǎn),設(shè)計(jì)對(duì)應(yīng)不同靶DNA 序列的間隔序列,插入到重復(fù)序列之間,經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄加工后會(huì)形成多個(gè)可定位于不同靶DNA 序列的雙引導(dǎo)RNA,或者串聯(lián)不同的sgRNA均可實(shí)現(xiàn)對(duì)哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因組的多個(gè)不同基因同時(shí)進(jìn)行編輯。

3 CRISPR技術(shù)的應(yīng)用

CRISPR/Cas9 系統(tǒng)作為新興的基因編輯技術(shù),目前已逐步在人類(lèi)細(xì)胞、斑馬魚(yú)、小鼠、酵母、果蠅、細(xì)菌及水稻等作物中進(jìn)行研究并報(bào)道。

在作物新品種培育和改造時(shí),傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育和改造新品種一般采用利用外源基因隨機(jī)整合的方式,轉(zhuǎn)基因表達(dá)的可控性較差。而CRISPR/Cas9 技術(shù)則可以進(jìn)行定點(diǎn)修飾,達(dá)到高效定向。Shan 等用該技術(shù)敲掉了小麥的一個(gè)基因,得到了耐白粉病的小麥新品種。該團(tuán)隊(duì)還利用CRISPR/Cas9 技術(shù)定點(diǎn)突變了小麥和水稻兩種作物的MLO 和PDS 等5 個(gè)基因。

在哺乳動(dòng)物的研究方面,研究人員采用該技術(shù)建立基因打靶小鼠,結(jié)果證實(shí),采用該技術(shù)不僅可以通過(guò)非同源末端連接途徑實(shí)現(xiàn)對(duì)多個(gè)靶基因的定點(diǎn)敲除,還可以通過(guò)同源重組途徑對(duì)多個(gè)靶基因進(jìn)行靶向修飾。這些成果為其在生物工程、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、醫(yī)藥學(xué)科等多種領(lǐng)域中的應(yīng)用中提供了有力的基礎(chǔ)。

4 展望

CRISPR/Cas9 作為細(xì)菌最為簡(jiǎn)單的Ⅱ型獲得性免疫系統(tǒng),被成功改造為繼TALEN 與ZFN 之后新一代基因組編輯技術(shù),為基因組的定向改造調(diào)控與應(yīng)用等帶來(lái)突破性革命,且相對(duì)于TALEN 和ZFN,CRISPR/Cas9有其獨(dú)特的優(yōu)勢(shì):(1)構(gòu)建和設(shè)計(jì)方法簡(jiǎn)單快捷,成本低廉,適用于任何分子生物實(shí)驗(yàn)室;(2)用于基因組的點(diǎn)突變編輯效率優(yōu)于ZFN和TALEN;(3)可同時(shí)實(shí)現(xiàn)多個(gè)基因的打靶??梢?jiàn),CRISPR/Cas9 在基礎(chǔ)理論研究、農(nóng)牧漁業(yè)和臨床治療等領(lǐng)域必將有越來(lái)越廣闊的應(yīng)用前景。當(dāng)然,目前關(guān)于CRISPR/Cas9 系統(tǒng)還有許多亟待解決的問(wèn)題,相信隨著人們逐步深入和全面的研究,CRISPR/Cas9 技術(shù)將會(huì)展現(xiàn)出其無(wú)比強(qiáng)大的生命力。

【參考文獻(xiàn)】

基因編輯技術(shù)范文第2篇

關(guān)鍵詞:轉(zhuǎn)基因;倫理;辯護(hù);限度

轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其應(yīng)用,是現(xiàn)代科技發(fā)展的前沿領(lǐng)域,其在種植業(yè)、養(yǎng)殖業(yè)、食品加工和醫(yī)藥制造等領(lǐng)域的廣泛應(yīng)用前景和巨大的商業(yè)利潤(rùn),已經(jīng)引起了各國(guó)政府和眾多企業(yè)的高度重視。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用已經(jīng)或正在給人類(lèi)帶來(lái)福祉,但與此同時(shí),由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)自身的特點(diǎn)及其難以準(zhǔn)確預(yù)測(cè)的后果,人們對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理爭(zhēng)論一直就沒(méi)有停止過(guò)——倫理上的否定和倫理上的肯定兩種針?shù)h相對(duì)的立場(chǎng)同時(shí)存在。這說(shuō)明,如果不能從倫理道德上為轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其應(yīng)用尋求恰當(dāng)?shù)睦碛?,那么,這一新科技將不能獲得健康的發(fā)展?;谏鲜隹紤],筆者力圖在本文中為轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其應(yīng)用尋求倫理上的支持,同時(shí)也力圖探討這種支持的限度。

一、福音與憂(yōu)慮:轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其特點(diǎn)

基因一詞是英語(yǔ)“gene”的音譯,它源于印歐語(yǔ)系,是“開(kāi)始”、“生育”的意思。很久以來(lái),人們并不明白遺傳的奧秘。19世紀(jì)的細(xì)胞學(xué)說(shuō)、達(dá)爾文的進(jìn)化論與孟德?tīng)柕倪z傳定律,為近代生物學(xué)的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)。孟德?tīng)枏耐愣箤?shí)驗(yàn)中推導(dǎo)出存在著專(zhuān)門(mén)承擔(dān)遺傳作用“種質(zhì)”的遺傳因子,從而演繹出孟德?tīng)栠z傳規(guī)律。1909年,丹麥學(xué)者約翰遜提出用基因來(lái)指稱(chēng)任何一種生物中控制任何遺傳性狀而其遺傳規(guī)律又符合孟德?tīng)柖傻倪z傳因子。1910年,摩爾根通過(guò)果蠅白眼突變研究,確證基因位于染色體上,隨后創(chuàng)立了基因論。1953年Waston和Crick創(chuàng)立了DNA雙螺旋結(jié)構(gòu),首次揭示了DNA分子的結(jié)構(gòu)、組成及功能,開(kāi)創(chuàng)了從分子水平揭示生命現(xiàn)象本質(zhì)的新紀(jì)元,揭開(kāi)了現(xiàn)代生物技術(shù)發(fā)展的序幕。1972年,美國(guó)斯坦福大學(xué)的生物化學(xué)教授PaulBerg和Jackson利用限制性?xún)?nèi)切酶和連接酶,得到了第一個(gè)體外重組的DNA分子,開(kāi)啟了重組DNA技術(shù)的先河,這是人類(lèi)歷史上第一次有目的的基因重組的成功嘗試。運(yùn)用重組DNA技術(shù)將外源的優(yōu)良目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞或組織,改變其遺傳組成后產(chǎn)生物質(zhì)及其后代,這就是轉(zhuǎn)基因技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)可以把任何外源的基因包括人、植物、動(dòng)物、微生物甚至人工合成的基因,整合到植物、動(dòng)物、微生物細(xì)胞中,使其具有人們所需要的各種性狀??梢?jiàn),轉(zhuǎn)基因技術(shù)使人獲得一種改變生物遺傳性狀、創(chuàng)造新物種的能力。

隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn),人類(lèi)跨入了基因工程時(shí)代:人們可以按照自己的意愿從生物體最基礎(chǔ)的遺傳物質(zhì)——DNA水平上來(lái)改造生物體,進(jìn)而改造整個(gè)自然界。正因?yàn)槿绱?,轉(zhuǎn)基因技術(shù)在農(nóng)業(yè)、工業(yè)、醫(yī)療方面都有廣泛的應(yīng)用。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用包括:(1)種植業(yè)。轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于植物育種,產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因作物,改變植物的遺傳特性,不僅可獲得抵御各種害蟲(chóng)和病毒、以及除草能力的作物,而且可以大大提高作物的產(chǎn)量和質(zhì)量;培育各種奇花異草等園藝品種。(2)養(yǎng)殖業(yè)。轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用于動(dòng)物育種,產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因動(dòng)物,即人工改變基因,使之具有優(yōu)質(zhì)、速生、高抗性等人類(lèi)需要的優(yōu)良特性的家畜家禽新品種。(3)醫(yī)藥業(yè)。利用轉(zhuǎn)基因細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),利用轉(zhuǎn)基因微生物發(fā)酵培養(yǎng)或利用轉(zhuǎn)基因動(dòng)植物作為生物反應(yīng)器來(lái)生產(chǎn)胰島素、干擾素等珍稀藥物,利用動(dòng)植物生產(chǎn)疫苗等。(4)食品加工業(yè)。利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)改良曲霉、酵母等微生物品種,發(fā)酵生產(chǎn)食品添加劑和加工助劑、醬油、奶制品等,達(dá)到提高產(chǎn)量或改善風(fēng)味等目的。此外,轉(zhuǎn)基因技術(shù)作為生物學(xué)領(lǐng)域的成果,正通過(guò)大量邊緣學(xué)科和相關(guān)行業(yè)的轉(zhuǎn)化、吸收,迅速滲透到電子、信息、乃至機(jī)電、環(huán)保等其他行業(yè),極大地改變了這些領(lǐng)域里的生產(chǎn)、管理、組織模式。成為推動(dòng)生產(chǎn)力進(jìn)步的強(qiáng)大內(nèi)動(dòng)力??傊赞D(zhuǎn)基因技術(shù)為基礎(chǔ)的生物技術(shù)“代表著最有前途的技術(shù)方向,是本世紀(jì)最具有影響的高新技術(shù)新興產(chǎn)業(yè)帶,是最有生命力的經(jīng)濟(jì)增長(zhǎng)鏈,是未來(lái)前景最有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)業(yè)群”。

當(dāng)然,轉(zhuǎn)基因技術(shù)是一種完全不同于傳統(tǒng)生物育種技術(shù)的新技術(shù),它有自身的特點(diǎn),這些特點(diǎn)主要有如下幾個(gè)方面:首先,轉(zhuǎn)基因技術(shù)打破了物種之間的界限,例如,在自然進(jìn)化中似乎不可能突破的動(dòng)物和植物之間的界限因?yàn)檗D(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn)而變成了現(xiàn)實(shí);其次,也因?yàn)檗D(zhuǎn)基因技術(shù)突破了物種之間的界限,從而也使人類(lèi)可以人為地改變自然物種的進(jìn)化方向與進(jìn)化速度,它可能導(dǎo)致這樣一種結(jié)果,在自然進(jìn)化狀態(tài)下也許要經(jīng)歷漫長(zhǎng)的時(shí)間才可能出現(xiàn)的新物種,在轉(zhuǎn)基因技術(shù)條件下短時(shí)間就可以出現(xiàn);由此,它引發(fā)出轉(zhuǎn)基因技術(shù)的第三個(gè)特點(diǎn),即它所可能導(dǎo)致的后果更加難以預(yù)測(cè)。轉(zhuǎn)基因技術(shù)和其他技術(shù)不同,它是一種生物技術(shù)即它是按照人的目的對(duì)生命存在的一種改造,創(chuàng)造出的是一些具有特殊性狀的生物新品種,它不像無(wú)機(jī)物的合成那樣,如果說(shuō)無(wú)機(jī)物的合成品仍然是無(wú)機(jī)物,那么轉(zhuǎn)基因技術(shù)的“作品”卻是有生命的,它能夠再生,而且其性狀可以遺傳給下一代。這些也許是“提前”到來(lái)的新物種會(huì)給整個(gè)生物界(包括人類(lèi))帶來(lái)什么樣的影響,實(shí)在難以預(yù)測(cè),這也就更加加深了人們的憂(yōu)慮。例如,人們已經(jīng)憂(yōu)慮轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用可能導(dǎo)致減少生物的多樣性,破壞生態(tài)平衡,增加某些疾病的人畜共患幾率,等等。

正因?yàn)檗D(zhuǎn)基因技術(shù)的上述特點(diǎn),使得人們圍繞它所進(jìn)行的倫理爭(zhēng)論一直就沒(méi)有停止過(guò),可以說(shuō),所有圍繞轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行的倫理論爭(zhēng),都是基于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的上述特點(diǎn)而展開(kāi)的。

二、道德還是不道德:圍繞轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理論爭(zhēng)及評(píng)析

圍繞轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理論爭(zhēng),表現(xiàn)在不同的學(xué)術(shù)流派中,這里限于篇幅,主要分析兩種針?shù)h相對(duì)的觀點(diǎn),即倫理上的反對(duì)與倫理上的支持。

先來(lái)看看對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)在倫理上持反對(duì)立場(chǎng)的觀點(diǎn)。從轉(zhuǎn)基因技術(shù)誕生的那天起,認(rèn)為轉(zhuǎn)基因技術(shù)違反倫理的觀點(diǎn)就一直沒(méi)有停止過(guò),有相當(dāng)多的學(xué)者甚至普通民眾都持這一立場(chǎng)。大致說(shuō)來(lái),這種反對(duì)立場(chǎng)又可以相對(duì)區(qū)分為兩個(gè)不同的層次:一是從根本上否定轉(zhuǎn)基因技術(shù)本身,有人把這一立場(chǎng)概括為“本質(zhì)方面”反對(duì);另一種是從轉(zhuǎn)基因技術(shù)的后果即其安全性和風(fēng)險(xiǎn)方面反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù),這一立場(chǎng)則通常被概括為“非本質(zhì)方面”反對(duì)。實(shí)質(zhì)上,“非本質(zhì)方面”的反對(duì)嚴(yán)格說(shuō)來(lái)并不是一種倫理上的判斷,它潛藏的結(jié)論是:假如人類(lèi)有足夠能力來(lái)規(guī)避轉(zhuǎn)基因技術(shù)應(yīng)用中所導(dǎo)致的不安全性后果,那么,是可以進(jìn)行轉(zhuǎn)基因技術(shù)的研究和應(yīng)用的,因此,對(duì)于非本質(zhì)方面的反對(duì)立場(chǎng),我們?cè)谶@里不打算作分析。

從本質(zhì)上反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的最激烈的觀點(diǎn),來(lái)自于自然中心主義的倫理觀。自然中心主義的倫理觀有如下幾個(gè)基本論點(diǎn):首先,它把對(duì)生命的尊重作為倫理學(xué)的理論基石,認(rèn)為無(wú)論是人、動(dòng)物還是植物,凡是有生命的存在都應(yīng)當(dāng)?shù)玫降赖律系耐茸鹬亍L├罩赋觯骸安扇∽鹬刈匀坏膽B(tài)度,就是把地球自然生態(tài)系統(tǒng)中的野生動(dòng)植物看作是具有固有價(jià)值的東西?!逼浯危鹬刈匀灰簿褪亲鹬刈鳛檎w的生物共同體,承認(rèn)構(gòu)成共同體的每種動(dòng)植物都具有內(nèi)在價(jià)值。生命的、固有的、內(nèi)在的價(jià)值就是因?yàn)樯旧碜猿赡康?。?duì)于人和其他動(dòng)植物生命個(gè)體來(lái)說(shuō),由于各自都具有一種內(nèi)在目的性,并且其他生命的內(nèi)在目的性勿需人的內(nèi)在目的性來(lái)確證,所以人不具有高于其他生命的特質(zhì)。因此,第三,應(yīng)把保持自然的“完整、穩(wěn)定和美麗”作為人類(lèi)行為的終極目的和對(duì)人對(duì)自然的行為進(jìn)行道德判斷的終極尺度。在人的倫理責(zé)任中應(yīng)包含不干涉其他生命體的存在、不作惡、保持對(duì)其他生命的尊重,并為自己的錯(cuò)誤行為作出補(bǔ)償?shù)葍?nèi)容。

基于以上理由,自然主義的倫理觀認(rèn)為跨越雜交屏障的基因轉(zhuǎn)移是非自然的,是對(duì)自然不合理的干涉,因而是不道德的。他們認(rèn)為,改造自然有兩種方式:一種是貼近自然或模仿自然的方式,另一種則是遠(yuǎn)離自然或非自然的方式。雖然不能說(shuō)轉(zhuǎn)基因是反自然的方式,但與傳統(tǒng)的更符合自然的方式相比,當(dāng)然是更為遠(yuǎn)離自然,是非自然的。第一,它是快速的,只用短短幾年甚至幾個(gè)月或幾天時(shí)間就可以把一個(gè)外來(lái)物種的基因片斷(遺傳物質(zhì))轉(zhuǎn)移到另一個(gè)物種中,并表達(dá)這個(gè)外來(lái)基因的產(chǎn)物——蛋白質(zhì)。第二,轉(zhuǎn)基因技術(shù)是激進(jìn)的和大跨度的,可以把兩個(gè)風(fēng)馬牛不相及的物種的基因結(jié)合在一起。比如,將土壤微生物毒蛋白基因轉(zhuǎn)移到水稻身上,使后者抗蟲(chóng);把北極魚(yú)的基因轉(zhuǎn)移到西紅柿身上,使其抗寒。而在自然的進(jìn)化方式中,當(dāng)然也存在基因交流和融合,但一是不會(huì)產(chǎn)生這種狂飆突進(jìn)式的基因轉(zhuǎn)移,二是不會(huì)產(chǎn)生這種大跨越式的遺傳物質(zhì)融合。一種物質(zhì)的某一性狀和特征需要適應(yīng)環(huán)境若干年才會(huì)形成和鞏固,它在進(jìn)化上是緩慢的,也是非常安全的。迅速的基因轉(zhuǎn)移既可能讓一個(gè)物種內(nèi)部難以適應(yīng)外來(lái)基因全面而有機(jī)的融入,也會(huì)使得這一物種由于特殊外來(lái)基因表達(dá)后產(chǎn)生新的特性(如抗蟲(chóng))而與環(huán)境和其他物種的關(guān)系難以迅速磨合,造成一系列問(wèn)題。因此,轉(zhuǎn)基因的方式違背了自然的內(nèi)在規(guī)律,是非自然、反進(jìn)化的。

與自然中心主義立場(chǎng)相接近的是宗教神學(xué)的立場(chǎng),它認(rèn)為自然界是上帝按照最完美的方式創(chuàng)造出來(lái)的,因此,自然的存在本身就是最完美最和諧的存在,轉(zhuǎn)基因技術(shù)以人為的方式打破了自然完美與和諧,是對(duì)上帝的蔑視和玩弄,因而是不道德的。

以上是從倫理道德上反對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的立場(chǎng)。另一方面,也有從倫理道德上支持轉(zhuǎn)基因技術(shù)的,這種立場(chǎng)主要來(lái)自于人類(lèi)中心主義者。

人類(lèi)中心主義也有幾個(gè)基本觀點(diǎn):首先,它認(rèn)為,人道原則應(yīng)該成為倫理學(xué)深層的價(jià)值論基礎(chǔ),人類(lèi)整體的長(zhǎng)遠(yuǎn)生存利益應(yīng)該成為人們行為的終極目的,以及人類(lèi)對(duì)待自然的行為進(jìn)行道德判斷的終極尺度,在人類(lèi)與自然的相互作用中應(yīng)將人類(lèi)的利益置于首要地位。其次,人類(lèi)實(shí)踐行為的目的不是為了實(shí)現(xiàn)自然規(guī)律,合乎自然的結(jié)果只是為了人類(lèi)更好的生存。拋開(kāi)人類(lèi)利益,人類(lèi)就沒(méi)有實(shí)現(xiàn)外部自然規(guī)律的義務(wù)和責(zé)任。再次,在自然界,基因的突變和交流是廣泛存在的,這是進(jìn)化的動(dòng)因,也是進(jìn)化最主要的來(lái)源之一。很多的野生物種之間基因的交流就導(dǎo)致我們這樣一個(gè)多種多樣的世界。轉(zhuǎn)基因技術(shù)與傳統(tǒng)的以及新近發(fā)展的亞種間雜交技術(shù)相比,在基本原則上并無(wú)實(shí)質(zhì)差別。它只不過(guò)是傳統(tǒng)的生物技術(shù)的延伸而已,是自然的。最后,為了滿(mǎn)足人類(lèi)的各種需要,我們應(yīng)該發(fā)展轉(zhuǎn)基因技術(shù)。

應(yīng)該說(shuō),上述兩種相互對(duì)立的倫理立場(chǎng)都有一定的道理。自然中心主義者看到了自然界非人類(lèi)生命存在具有自己的內(nèi)在價(jià)值,這種內(nèi)在價(jià)值并不需要人類(lèi)來(lái)加以確證,因此,人類(lèi)應(yīng)對(duì)自然界中的生命存在保持應(yīng)有的尊重,這一點(diǎn),無(wú)論是從理論上還是從實(shí)踐上看都具有一定的合理性。事實(shí)上,如果我們不是狹義地理解價(jià)值這個(gè)范疇,即不再把價(jià)值僅僅理解為物對(duì)人的關(guān)系,而是把價(jià)值理解為相互作用與影響的存在之間的意義關(guān)系,那么,在自然的演化系統(tǒng)中,任何一種存在都是有確定的價(jià)值與意義的,非人類(lèi)生命存在的價(jià)值的確不需要人類(lèi)來(lái)確證。因此,人類(lèi)并沒(méi)有比其他生命存在更為優(yōu)越的地位。在這個(gè)意義上,提出人類(lèi)應(yīng)尊重自然界中非人類(lèi)生命存在的權(quán)利是有道理的。從實(shí)踐上看,在人類(lèi)歷史的發(fā)展過(guò)程中,正是由于我們過(guò)分強(qiáng)調(diào)了人類(lèi)對(duì)于非人類(lèi)生命存在的優(yōu)越地位,把自然中的非人類(lèi)存在僅僅當(dāng)作對(duì)于人類(lèi)而言的工具性?xún)r(jià)值,才導(dǎo)致了人類(lèi)對(duì)自然的瘋狂掠奪,導(dǎo)致了生態(tài)危機(jī),也使人類(lèi)的生存環(huán)境惡化。改變這種狀況的一個(gè)重要途徑,就是轉(zhuǎn)化人類(lèi)在處理自身與自然關(guān)系時(shí)的價(jià)值思維模式。否則,人類(lèi)將永遠(yuǎn)不可能實(shí)現(xiàn)與自然界中非人類(lèi)的生命存在和諧相處,共生共榮。

但是,自然中心主義的倫理觀根本不考慮人類(lèi)在自然中是一種特殊存在,即人類(lèi)是迄今為止在自然界中惟一可以認(rèn)識(shí)自然必然性、利用自然必然性從而在一定程度上超越自然必然性的存在這一客觀的、科學(xué)的事實(shí),力圖把人的活動(dòng)降低為動(dòng)物活動(dòng)的水平,則是錯(cuò)誤的。在漫長(zhǎng)的自然演化過(guò)程中,人類(lèi)從生物世界中脫穎而出,獲得了超出其他生命存在的智慧,使人類(lèi)獲得了一定程度的自由:人可以以自己的需要、目的與愿望為尺度,對(duì)自己置身其中的自然進(jìn)行否定性的實(shí)踐活動(dòng),使之符合自己的需要。這種對(duì)自然的否定性的實(shí)踐活動(dòng)正是人類(lèi)文化發(fā)生的最深刻的根源??梢哉f(shuō),人類(lèi)在自然中的大多數(shù)活動(dòng)都帶有否定性的特點(diǎn),在某種意義上,即是對(duì)自然的“不尊重”。自然中心主義者無(wú)視這一點(diǎn),并不是實(shí)事求是的態(tài)度。如果說(shuō)自然中心主義者無(wú)視人類(lèi)活動(dòng)的特殊性,而力圖把人類(lèi)活動(dòng)降低為動(dòng)物的水平的話(huà),那么人類(lèi)中心主義者則恰好相反,他們看到了人類(lèi)和人類(lèi)活動(dòng)的特殊性,肯定人類(lèi)的活動(dòng)不可能是一種簡(jiǎn)單地重復(fù)自然必然性的活動(dòng),而是從自己的需要、愿望和目的出發(fā),力圖把自己從自然必然性中提升出來(lái)的活動(dòng),因此,人類(lèi)不可能不干預(yù)自然。要求人類(lèi)的活動(dòng)還原為其他生命存在的本能地適應(yīng)自然的活動(dòng),是沒(méi)有道理的。應(yīng)該說(shuō),人類(lèi)中心主義的這一立場(chǎng)也具有一定的合理性。但是,人類(lèi)中心主義者把人類(lèi)的特殊性無(wú)限放大了,把人類(lèi)的需要、目的與愿望當(dāng)作衡量其他生命存在的惟一尺度,非人類(lèi)的生命存在只有在人類(lèi)的需要、目的與愿望面前去尋找自己存在的理由。因此,只要有需要,人類(lèi)就可以利用自己的智慧任意去操縱自然。從理論上說(shuō),人類(lèi)中心主義者的上述立場(chǎng),是對(duì)“價(jià)值”這一范疇作了非常狹義的理解,即只把價(jià)值看作是物對(duì)人的需要滿(mǎn)足的關(guān)系,而不是把價(jià)值理解為相互作用的對(duì)象之間的意義關(guān)系,這是典型的人類(lèi)的“狂妄”。從實(shí)踐上看,上述思維方式導(dǎo)致了人與自然之間的緊張,現(xiàn)代社會(huì)中人類(lèi)生存環(huán)境的惡化與其有著密切的聯(lián)系。

最后,還應(yīng)該指出,盡管自然中心主義和人類(lèi)中心主義存在著沖突與對(duì)立的一面,但是兩者又有共同的局限,即它們都堅(jiān)持一種自然與人類(lèi)兩分的立場(chǎng),把自然的演化過(guò)程和人類(lèi)的活動(dòng)對(duì)立起來(lái),從而使得他們無(wú)論是對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理支持還是對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理否定,都沒(méi)有足夠的理由。擺脫這一困境的思路,就是要超越自然中心主義和人類(lèi)中心主義,在一個(gè)更高的基礎(chǔ)上去考察轉(zhuǎn)基因技術(shù)存在的倫理理由及其限度。

三、支持與限度:新自然觀視野中轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理維度

如在對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行倫理判斷時(shí),既不能堅(jiān)持自然中心主義的立場(chǎng),也不能堅(jiān)持人類(lèi)中心主義的立場(chǎng),那么,轉(zhuǎn)基因技術(shù)還能獲得倫理上的支持嗎?我們的回答是肯定的,即它是可以獲得倫理上的支持的。但是,我們同時(shí)又認(rèn)為,這種倫理上的支持并不是至上的,而是相對(duì)的、有限度的。我們的觀點(diǎn)是,在對(duì)待轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理立場(chǎng)上,必須要考慮兩個(gè)倫理維度:一方面,我們要考慮自然的權(quán)利,尊重自然;另一方面,我們也要考慮人類(lèi)的利益,尊重人類(lèi)活動(dòng)的目的。一句話(huà),要把自然的權(quán)利和人類(lèi)的權(quán)利結(jié)合起來(lái),在兩者之間保持必要的張力,從而使自然和人類(lèi)實(shí)現(xiàn)和諧共生。

之所以做出這樣的判斷,是基于對(duì)人類(lèi)中心主義對(duì)自然權(quán)利和價(jià)值的漠視所帶來(lái)的生態(tài)環(huán)境惡化以及自然中心主義對(duì)人類(lèi)權(quán)利和價(jià)值的漠視所導(dǎo)致人類(lèi)無(wú)所作為的后果的判斷。我們認(rèn)為,要給轉(zhuǎn)基因技術(shù)一種恰當(dāng)?shù)膫惱砝碛桑斜匾黄苽鹘y(tǒng)自然中心主義和人類(lèi)中心主義的思維模式,在一個(gè)新的更高的基礎(chǔ)上來(lái)重新思考自然與人類(lèi)的關(guān)系。在這里,我們提出一種新的自然觀,以作為我們這一立場(chǎng)的理論基礎(chǔ)。這種新自然觀的主要內(nèi)容可以概括為:從人的現(xiàn)實(shí)存在的特點(diǎn)出發(fā),把人的活動(dòng)納入自然演化的總體進(jìn)程來(lái)加以考察,以此來(lái)進(jìn)一步思考人類(lèi)在自然演化進(jìn)程中的權(quán)利、義務(wù)與責(zé)任,并以此來(lái)透視轉(zhuǎn)基因技術(shù)的倫理合理性及其限度。

把人類(lèi)的活動(dòng)納入自然演化的進(jìn)程來(lái)思考,無(wú)論是從客觀事實(shí)存在上看還是從思想史上看,都是有依據(jù)的。從客觀事實(shí)存在上看,人類(lèi)本身是自然界長(zhǎng)期演化的結(jié)果,這意味著人類(lèi)的出現(xiàn)既是自然界中增添了一個(gè)新的成員,同時(shí),人類(lèi)也就成為自然生態(tài)系統(tǒng)中的一個(gè)環(huán)節(jié)而參與自然的總體的演化過(guò)程。

從思想史的角度看,盡管有不少的思想家把人類(lèi)的活動(dòng)和自然的演化對(duì)立起來(lái),或者強(qiáng)調(diào)人類(lèi)活動(dòng)對(duì)于自然演化的優(yōu)先地位(如人類(lèi)中心主義者),或者把自然的演化看作是既定完美與和諧的,人類(lèi)的活動(dòng)只會(huì)對(duì)這種完美與和諧的破壞(如自然中心主義者),但是把人類(lèi)的活動(dòng)納入自然演化過(guò)程進(jìn)行思考的思想學(xué)說(shuō)卻仍然是存在的,最典型的就是中國(guó)智慧中的儒家學(xué)說(shuō)。儒家的主流思想是認(rèn)為天人合一,人性與天地萬(wàn)物之性相通,因此,人只要能盡自己的本性,就能盡天地萬(wàn)物之本性,因而能夠參與天地萬(wàn)物的演化過(guò)程?!拔ㄌ煜轮琳\(chéng),為能盡其性;能盡其性則能盡人之性;能盡人之性,則能盡物之性;能盡物之性,則可以贊天地之化育;可以贊天地之化育,則可以與天地參矣?!?《中庸》)雖然,這里強(qiáng)調(diào)“能盡人之性”是“能盡物之性”的前提,但是,這決不是以人為尺度來(lái)輔量裁成萬(wàn)物。因?yàn)?,依儒家的立?chǎng),天地之性恰恰在于它能促成萬(wàn)物自由地生長(zhǎng)發(fā)育,即所謂“生生之德”,也就是真正意義上的仁德。所以,盡人之性以參與天地萬(wàn)物的演化過(guò)程,不是以犧牲非人類(lèi)的生物存在的利益為前提的,從而它不表現(xiàn)為人類(lèi)中心主義。但既然是人參與其中的演化過(guò)程,它也就必然地帶上人類(lèi)的價(jià)值目的與追求,因此,它又不可能表現(xiàn)為對(duì)自然地消極服從,因而,它和自然中心主義也有著本質(zhì)的區(qū)別。這一點(diǎn),從儒家的仁者情懷中可以看得非常清楚。儒家認(rèn)為,天地有自己演化的規(guī)律,但必然之中有偶然,在自然界中,經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生“離經(jīng)叛道”的情形,使生命存在并不能按照自己的本性來(lái)伸張、發(fā)育自己,改變這種現(xiàn)狀的責(zé)任就落到了通天地之道的人的身上,所謂“儒者與天地萬(wàn)物為一體。假使一物不得其所,便是吾仁未有盡處”。另外,儒家還認(rèn)為,自然只是提供了萬(wàn)物演化的可能性,這種可能性向現(xiàn)實(shí)性的轉(zhuǎn)化,也需要通過(guò)人的活動(dòng),即所謂“天地設(shè)位,圣人成能;人謀鬼謀,百姓與能”(《易傳·系辭上》)。當(dāng)然,“天地設(shè)位,圣人成能”的過(guò)程,同樣不是人的主觀隨意的過(guò)程,相反,它是一個(gè)充分考慮了人的生命理想和非人類(lèi)存在的本性的過(guò)程,是“近取諸身,遠(yuǎn)取諸物”的過(guò)程,因而,也就是一個(gè)充分考慮了人的活動(dòng)目的和自然界中其他生命存在的價(jià)值與意義的過(guò)程??傊?,中國(guó)傳統(tǒng)的儒家思想,確乎在一定程度上體現(xiàn)了這樣一種思維方式:即既把人的活動(dòng)納入自然的演化過(guò)程,同時(shí)又充分注意到了人作為一種特殊的存在而在自然演化中所起的特殊作用的思維方式。這種思維方式,正是我們今天超越自然中心主義和人類(lèi)中心主義的重要思想資源。

即使從宗教神學(xué)的立場(chǎng)上看,我們也同樣可以把作為人的活動(dòng)的具體形式的轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用看作是自然演化的重要環(huán)節(jié)。因?yàn)椋鳛樵煳镏?,上帝既然賦予了人類(lèi)以智慧,那就意味著人類(lèi)必然要運(yùn)用自己的智慧來(lái)從事自己的活動(dòng),這正是順從了造物主的意愿。相反,如果人類(lèi)不運(yùn)用自己的智慧,反倒是對(duì)上帝的不尊重,是違反了上帝的旨意!

以上述立場(chǎng)來(lái)看待轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其應(yīng)用,我們就不會(huì)簡(jiǎn)單地認(rèn)為轉(zhuǎn)基因技術(shù)是反自然的,是對(duì)自然界中非人類(lèi)存在的生命的不尊重。

更進(jìn)一步,當(dāng)我們考慮自然存在及其演化方式時(shí),我們將更加清楚地看到轉(zhuǎn)基因技術(shù)及其應(yīng)用的自然本性。我們知道,在自然界中,生物之間、生物和無(wú)機(jī)物之間,都在以不同的方式進(jìn)行物質(zhì)、信息和能量的轉(zhuǎn)化,人類(lèi)和自然的其他存在之間同樣存在著以自己的方式進(jìn)行的物質(zhì)、能量、信息的轉(zhuǎn)化。這種轉(zhuǎn)化是自然存在和演化的方式,沒(méi)有它,就無(wú)所謂自然,因此,這里并不存在從人類(lèi)的視角來(lái)看的道德與不道德的問(wèn)題。老虎吃羊或其他比自己弱小的動(dòng)物,我們并不會(huì)對(duì)之進(jìn)行道德評(píng)價(jià),因?yàn)檫@是自然的演化方式。轉(zhuǎn)基因技術(shù)的應(yīng)用同樣可以看作是人類(lèi)與非人類(lèi)之間進(jìn)行的物質(zhì)、信息和能量的轉(zhuǎn)化方式。既如此,我們又怎能簡(jiǎn)單地對(duì)其進(jìn)行倫理上的“是”或“否”的判斷呢?

上面的分析是不是意味著人類(lèi)所有的針對(duì)自然的活動(dòng),都不需要進(jìn)行倫理道德上的考慮?是不是都不需要受倫理道德的制約呢?答案當(dāng)然是否定的。我們?cè)谏厦娣磸?fù)提到,不能對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行“簡(jiǎn)單的”倫理上的“是”或“否”的判斷,恰好意味著對(duì)轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行倫理判斷的復(fù)雜性,這種復(fù)雜性來(lái)源于人類(lèi)存在的特殊性:人類(lèi)雖然是自然大家庭中的一員,但他卻是自然中最為特殊的成員——人是一種有智慧的、自由的存在。正是這樣一種特殊性,使人類(lèi)的活動(dòng)不同于非人類(lèi)的其他生命存在的活動(dòng)。如果說(shuō),非人類(lèi)的生命存在的活動(dòng)完全受著自然這個(gè)整體的必然性的制約,只能是一種被動(dòng)地適應(yīng)自然的活動(dòng),那么,人類(lèi)則完全有可能憑借自己的智慧認(rèn)識(shí)、利用并在一定程度上超越這種必然性。人類(lèi)對(duì)自然必然性的超越,意味著自然的演化過(guò)程帶有了更多的“人類(lèi)性”因素——人類(lèi)總是力圖以自己的需要、愿望和目的為尺度,使自然的演化朝著自己所欲求的方向發(fā)展。這就導(dǎo)致了在自然這個(gè)大家庭中,人類(lèi)活動(dòng)的自主自為性與非人類(lèi)生命存在活動(dòng)的被動(dòng)適應(yīng)性之間的沖突。這種沖突提供了我們對(duì)人類(lèi)活動(dòng)進(jìn)行倫理考量的可能性和必要性。

基因編輯技術(shù)范文第3篇

關(guān)鍵詞:細(xì)菌;鞭毛;銀染法;培養(yǎng)基;玻片;染色

1資料與方法

1.1一般資料

1.1.1供試菌種 枯草桿菌(Bacillus subtilis).粘質(zhì)沙雷氏菌(Serratia marcescens)由湖南師范大學(xué)微生物教室提供。

1.1.2培養(yǎng)基 配方組成:牛肉膏10 g,蛋白胨15 g,瓊脂15 g,氯化鈉5 g,蒸餾水1000 mL,pH 7.2。(牛肉膏、蛋白胨由杭州微生物試劑有限公司生產(chǎn),瓊脂由福建省石獅市寶雙塔瓊脂加工廠生產(chǎn))。按上述配方配好培養(yǎng)基后,用干凈試管分裝包捆好,經(jīng)高壓滅菌擺斜面冷卻凝固, 然后放入冰箱冷藏24 h,使斜面析出冷凝水,為供試菌活化提供斜面培養(yǎng)基。

1.2方法

1.2.1載玻片洗滌 新玻片的洗滌,用洗衣粉煮沸玻片1 h,然后用自來(lái)水沖洗干凈,瀝干后用95%的乙醇侵泡備用;用后玻片的洗滌,采取稀溶液洗滌法,將重鉻酸鈉或重鉻酸鉀50 g先溶解于850 mL自來(lái)水中,然后慢慢加熱溶解,待冷卻后除除加入100 mL濃硫酸,邊加邊攪動(dòng)。此溶液氧化能力極強(qiáng),具有極強(qiáng)的去油污作用。對(duì)處理玻片應(yīng)放入溶液中加蓋密封,(以防溶液氧化變質(zhì))。一般侵泡2 d取出沖洗干凈,瀝干后用95%的乙醇侵泡備用。如除污劑侵泡時(shí)間太長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致玻片變質(zhì)不能使用。對(duì)劃傷較嚴(yán)重的玻片,建議不要使用, 以免影響染色效果。

1.2.2供試菌活化 為增強(qiáng)細(xì)菌的活動(dòng)力,將供試菌放在30℃的培養(yǎng)箱內(nèi)連續(xù)培養(yǎng)活化五代(每代12 h)。然后將最后一代轉(zhuǎn)接放入31℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)12 h,作為細(xì)菌鞭毛染色的最佳時(shí)期。

1.2.3菌種稀釋孵育 取斜面活化菌種2~3環(huán)于盛有2 mL無(wú)菌水試管中,制成輕度渾濁的菌懸液,然后把試管直立于36℃水浴鍋中孵育9 min,讓菌體表面附著的鞭毛自然舒展游動(dòng)。實(shí)驗(yàn)表明,細(xì)菌孵育5 min,只有部分鞭毛舒展游動(dòng),染色效果欠佳;孵育18 min菌體鞭毛染色明顯很大,與真實(shí)細(xì)菌差異較大;超過(guò)25 min后鞭毛從菌體上自然脫落,染色效果較差。孵育好的菌懸液在操作時(shí)不要用手搖動(dòng)試管,避免鞭毛脫落影響染色效果。

1.2.4染液配制 鞭毛染液由媒染液和染色液組成。媒染液由單寧酸5 g,三氯化 1.5 g,氫氧化鈉1%1.0 g,福爾馬林(15%)2.0 mL,蒸餾水100mL組成;染色液由硝酸銀2 g,氫氧化氨(N滴),蒸餾水100 mL組成。

1.2.4.1媒染液配制 把稱(chēng)量丹寧酸和三氯化鐵藥品同時(shí)放入100 mL蒸餾水中加熱熔解,然后加入2 mL甲醛溶液和1mL NaoH,待藥液混合后補(bǔ)足水量,過(guò)濾備用。將該液置冰箱內(nèi)保存3~7 d。仍能使用。

1.2.4.2染色液配制 須把握二個(gè)環(huán)節(jié):第一個(gè)環(huán)節(jié)(褐色變?yōu)槌吻宓倪^(guò)程):在100 mL硝酸銀溶液中取10 mL作回滴液,然后在90 mL溶液中滴加氫氧化銨,使無(wú)色的硝酸銀溶液全部變?yōu)楹稚珪r(shí),繼續(xù)滴加氫氧化銨至到溶液中的褐色沉淀剛剛消失變澄清為止;第二個(gè)環(huán)節(jié)(沉淀消失變?yōu)榉€(wěn)定薄霧狀的過(guò)程):澄清硝酸銀溶液滴加回滴液,當(dāng)出現(xiàn)白霧,輕輕搖動(dòng)后,薄霧狀沉淀又消失,再繼續(xù)小心滴加,直到搖動(dòng)后出現(xiàn)輕微而穩(wěn)定的薄霧狀,停止加入回滴液即可。密封保存冰箱內(nèi)3~7 d方可使用。

1.2.5制片染色 節(jié)用鑷子在95%乙醇溶液中夾起一塊載玻片, 在火焰上燒去玻片上的殘留油跡, 然后把玻片放在桌面上形成一定的傾斜度,在玻片的上端滴上一滴孵育后的菌懸液,讓?xiě)乙簭牟F囊欢司徛飨蛄硪欢?,用吸水紙吸去玻片下端的多余菌液,在室溫下自然干燥。?dāng)制片干燥出現(xiàn)一條淺灰色的菌膜帶為止。取少量媒染液覆蓋在菌膜上媒染4 min,用蒸餾水沖洗至玻片下端流出無(wú)藍(lán)色的清水為止,繼續(xù)用染色液沖去殘水,然后在涂片上滴加大量的染色液染色,當(dāng)涂片染色部分變?yōu)樯詈稚珪r(shí),立即用蒸餾水沖洗,放置室溫下自然干燥。如在氣溫較低的情況下,若加染色液顯色較慢,可用木夾夾住染色涂片,在文火上加熱沸騰,并及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)掉的染色液,待染色玻片出現(xiàn)深褐色時(shí)立即用蒸餾水沖洗。自然干燥。在加熱過(guò)程中,應(yīng)及時(shí)補(bǔ)充蒸發(fā)掉的染色液,可避免菌體鞭毛脫落、斷裂。提高鞭毛的染色效果。

1.2.6鏡檢攝影 鏡檢前,先用3∶7的乙醚和無(wú)水酒精組成的去污劑,把顯微鏡的光學(xué)部分檫試干凈。(用去污劑保護(hù)鏡頭,并延長(zhǎng)顯微鏡的使用壽命)。油鏡觀察:把制片放到載物臺(tái)上擺正夾好,利用聚光鏡的光源,將玻片上的褐色部分滴1~2滴香柏油, 用粗調(diào)把高倍鏡慢慢放下和油接觸(動(dòng)作要輕避免損壞玻片和鏡頭),然后利用推進(jìn)器移動(dòng)在視野內(nèi)觀察菌體鞭毛。實(shí)驗(yàn)完畢后,分3步把鏡頭處理干凈,首先用檫鏡紙把鏡頭上的油檫掉,然后用去污劑把鏡頭上的殘留油跡檫干凈,最后用檫鏡紙檫一遍即可。

用生物攝影顯微鏡(YS100)觀察結(jié)果并拍攝圖片電腦保存。

2結(jié)論

2.1玻片洗滌 如玻片油污洗滌不干凈, 在制片時(shí),菌液在斜面上滾動(dòng)不易粘膜,在干燥的玻片上形成了一些斷斷續(xù)續(xù)的斑塊性菌膜 ,細(xì)菌鞭毛堆積成團(tuán), 鞭毛交叉粘連。說(shuō)明洗滌玻片是鞭毛染色成功不可疏忽的問(wèn)題之一。

2.2配方改進(jìn) 將原配方牛肉膏5 g,增加為10 g,蛋白胨10 g,增加到為15 g,瓊脂1.8%~2.0%減少為1.5%。此配方提供了大量的維生素生長(zhǎng)因素,使培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)更豐富,培養(yǎng)基硬度更適宜,斜面培養(yǎng)物明顯比原培養(yǎng)基豐厚得多,更利于枯草桿菌和粘質(zhì)沙雷氏菌的鞭毛形成和生長(zhǎng),粘質(zhì)沙雷氏菌,細(xì)菌不但鞭毛多,粗狀,鞭毛染色效果好,而且著色更容易而均勻。圖片背景淺褐色且非常干凈,見(jiàn)圖1。

圖1 粘質(zhì)沙雷氏菌(周生鞭毛)×100

2.3鞭毛生長(zhǎng)線 根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果劃分為4個(gè)生長(zhǎng)期。鞭毛生長(zhǎng)初期:當(dāng)溫度為27℃時(shí)培養(yǎng)8 h,少數(shù)鞭毛生長(zhǎng)短小;鞭毛生長(zhǎng)期: 當(dāng)溫度為29℃時(shí)培養(yǎng)10 h,大部分鞭毛生長(zhǎng)細(xì)長(zhǎng);鞭毛生長(zhǎng)最佳期: 當(dāng)溫度為31℃時(shí)培養(yǎng)12 h,鞭毛生長(zhǎng)多,粗狀,易著色且均勻,是鞭毛染色的最佳時(shí)期;鞭毛生長(zhǎng)脫落期:當(dāng)溫度為33℃時(shí)培養(yǎng)14 h,鞭毛開(kāi)始大量脫落,不利于鞭毛染色。如圖2為枯草桿菌和粘質(zhì)沙雷氏菌鞭毛生長(zhǎng)線,實(shí)驗(yàn)表明,若菌齡培養(yǎng)12 h,是鞭毛染色的最佳時(shí)期,其他大于或小于12 h都不利于鞭毛染色。

2.4菌液孵育 孵育溫度和時(shí)間是鞭毛染色成功的關(guān)鍵之一,細(xì)菌孵育

2.5水洗與媒染 如媒染后,用蒸餾水沖洗不充分,菌體鞭毛都變?yōu)樯钏{(lán)色,藍(lán)色背景并伴有大小不等的顆粒狀物;如媒染液用量過(guò)多,所產(chǎn)生的染液氣泡,在背景中形成許多灰白色的斑塊,且伴有大小不等的顆粒狀物,把握上述情況影響了制片效果。

參考文獻(xiàn):

[1]關(guān)曉利,任建國(guó).細(xì)菌鞭毛最佳染色方法的選擇[J].運(yùn)城學(xué)院學(xué)報(bào),2005.

[2]王桂萍,朱陶,王宜磊,等.優(yōu)化的細(xì)菌鞭毛染色技術(shù)[J].微生物學(xué)雜志,2007.

基因編輯技術(shù)范文第4篇

關(guān)鍵詞 媒介 技術(shù) 隱喻

中圖分類(lèi)號(hào)G206  文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A

技術(shù)之于媒介正如大腦之于思想,像大腦一樣,技術(shù)只是一件物質(zhì)裝置,而媒介如思想一樣,是把技術(shù)投入使用,并發(fā)揮其對(duì)文化主導(dǎo)作用的工具。媒介技術(shù)的發(fā)展不僅改變信息的傳輸方式、改變?nèi)祟?lèi)的閱讀習(xí)慣,更重要的是,作為人類(lèi)認(rèn)知世界、溝通聯(lián)系的手段,它在某種程度上塑造了整個(gè)社會(huì)的認(rèn)知模式、態(tài)度和價(jià)值。這種強(qiáng)大力量的實(shí)現(xiàn)正是媒介隱喻的體現(xiàn)。

一、媒介的隱喻

隱喻屬于語(yǔ)言學(xué)的范疇,是語(yǔ)言學(xué)中的一種修辭手法?!半[喻”一詞來(lái)自于希臘語(yǔ)metaphora,其希臘文的意思是“意義的轉(zhuǎn)換”,即賦予一個(gè)詞本身沒(méi)有的涵義或者是用另外一個(gè)詞表達(dá)它本來(lái)表達(dá)不了的涵義。也就是說(shuō),語(yǔ)言取消自身的日常描述功能,從而承擔(dān)起再描述的特殊功能。這樣,隱喻就包含著一種超越詞語(yǔ)本身的“新的信息”,而這種新的信息是在詞語(yǔ)與周?chē)F(xiàn)實(shí)的關(guān)系中誕生的。北美媒介生態(tài)學(xué)者尼爾?波茲曼曾在對(duì)麥克盧漢“媒介即訊息”理論發(fā)揮的基礎(chǔ)上,提出了“媒介即隱喻”的觀點(diǎn),強(qiáng)調(diào)的是媒介“用一種隱蔽但有利的暗示來(lái)定義現(xiàn)實(shí)世界”。由此實(shí)現(xiàn)自身的隱喻功能。

隱喻不僅屬于語(yǔ)言,而且屬于思想、活動(dòng)、行為。也就是說(shuō),每一種媒介技術(shù)的出現(xiàn),必然要在與周?chē)F(xiàn)實(shí)的關(guān)系中,獲得一種新的涵義,而這種新的涵義更多地關(guān)乎思考方式和行為方式的變化。正如波德里亞所說(shuō),“鐵路所帶來(lái)的‘信息’,并非它運(yùn)送的煤炭或旅客,而是一種世界觀、一種新的結(jié)合狀態(tài),等等。電視帶來(lái)的‘信息’,并非它所傳送的畫(huà)面,而是它所造成的新的關(guān)系和感知模式、家庭和集團(tuán)傳統(tǒng)結(jié)構(gòu)的改變。”。因此,媒介技術(shù)所帶來(lái)的不僅僅是一場(chǎng)關(guān)于信息的革命,更是對(duì)社會(huì)慣例和思想領(lǐng)域的一次大的變革。一旦技術(shù)使用了某種特殊的象征符號(hào),在某種特殊的社會(huì)環(huán)境中找到了自己的位置,或融人到了當(dāng)時(shí)的經(jīng)濟(jì)和政治領(lǐng)域中,它就會(huì)變成媒介。換句話(huà)說(shuō),一種技術(shù)只是一臺(tái)機(jī)器,而媒介是這臺(tái)機(jī)器創(chuàng)造的社會(huì)和文化環(huán)境。由此,媒介的隱喻表現(xiàn)在其超越了自身存在的技術(shù)涵義,而具有更為廣泛的社會(huì)意義。

二、媒介技術(shù)的生態(tài)環(huán)境

所謂生態(tài),通常是指在一個(gè)生物群落及其生存發(fā)展的系統(tǒng)之中,各種因素的相互關(guān)聯(lián)制約所達(dá)到的相對(duì)的平衡結(jié)構(gòu)。生態(tài)是一個(gè)整體性的概念,首先意味著對(duì)環(huán)境的研究――它們的結(jié)構(gòu)、內(nèi)容及對(duì)人類(lèi)的影響。當(dāng)然,這并非說(shuō)生態(tài)與環(huán)境是等同的。環(huán)境是自然的存在物,它包括作為影響一個(gè)生物體生長(zhǎng)、發(fā)展和生存的外界物質(zhì)條件的自然環(huán)境,以及作為影響個(gè)人和社會(huì)本質(zhì)的社會(huì)文化條件的社會(huì)環(huán)境。而生態(tài)不僅指自然的存在方式,還包括人與自然存在和社會(huì)存在的親和關(guān)系,更多的是體現(xiàn)一種相互依存的整體化的系統(tǒng)聯(lián)系。因此,生態(tài)就是與人類(lèi)生存有關(guān)的一切,強(qiáng)調(diào)的是人類(lèi)無(wú)法離開(kāi)環(huán)境而生存。應(yīng)該說(shuō)在環(huán)境所施加的物質(zhì)條件以及人類(lèi)活動(dòng)的參與下,所有的文化特征都具有了生態(tài)意義。

由此,媒介本身也具有一種生態(tài)意義,媒介內(nèi)在的符號(hào)結(jié)構(gòu)不僅會(huì)決定信息的產(chǎn)生,還會(huì)對(duì)該環(huán)境中人們的行為產(chǎn)生影響。因?yàn)?,媒介首先是在一種傳播環(huán)境中存在,每~種媒介在傳播者的控制下。也必然對(duì)接收者產(chǎn)生各種影響。因此,現(xiàn)代傳播學(xué)者在談到媒介時(shí),開(kāi)始強(qiáng)調(diào)媒介與人之間的關(guān)系,強(qiáng)調(diào)無(wú)法脫離人的一切實(shí)踐及其所形成的文化環(huán)境來(lái)看待處于不同傳播活動(dòng)中的媒介。媒介傳播的影響力,對(duì)未來(lái)時(shí)代的貢獻(xiàn)能力部分決定于個(gè)體本身(即媒介技術(shù)、信息表現(xiàn)形式等)的區(qū)別,部分決定于環(huán)境的影響。因?yàn)榄h(huán)境條件必然會(huì)限定一種媒介的形成、發(fā)展和衰落,就像環(huán)境條件會(huì)限定一個(gè)物種的出生率、生長(zhǎng)率和死亡率水平一樣。例如在電子媒介時(shí)代,電視媒介所帶來(lái)的圖像性的認(rèn)知模式必然會(huì)促成網(wǎng)絡(luò)的形成,以幫助一部分人實(shí)現(xiàn)對(duì)文字的膜拜,而幫助另一部分人實(shí)現(xiàn)對(duì)自由的崇尚。那么,站在生態(tài)的角度來(lái)理解媒介會(huì)發(fā)現(xiàn)。媒介自身也會(huì)形成一種環(huán)境,在人類(lèi)實(shí)踐活動(dòng)的參與下,媒介生態(tài)呈現(xiàn)出自身獨(dú)有的關(guān)注角度。從生態(tài)學(xué)的框架結(jié)構(gòu)中,可以看到今天的人并非住在一個(gè)物理世界中,而是住在象征的世界中,這便是媒介技術(shù)向我們提供的一種生態(tài)環(huán)境。像絕大多數(shù)的自我作用系統(tǒng)一樣,媒介生態(tài)系統(tǒng)在整個(gè)歷史中發(fā)生了相當(dāng)巨大的變化,每一種變化都實(shí)現(xiàn)著其隱喻功能的再定義。

三、媒介技術(shù)隱喻功能的實(shí)現(xiàn)

媒介的變遷導(dǎo)致了并意味著認(rèn)識(shí)世界的方式的變化,這是由于媒介強(qiáng)大的隱喻功能所產(chǎn)生的效果。每一種傳播媒介不僅記錄了自己時(shí)代的思想,更是記錄了特定時(shí)代的傳播技術(shù)、經(jīng)濟(jì)制度和文化制度,同時(shí)也記錄和影響了每個(gè)時(shí)代的思想變革。

思想必須先經(jīng)受住時(shí)間的檢驗(yàn),然后才能在空間領(lǐng)域進(jìn)行傳播,而思想的生命就往往取決于傳播媒介的生命力和延伸性。由此,盡管傳統(tǒng)的口頭傳播行為被認(rèn)為是落后的表現(xiàn),但事實(shí)上,這種古老的信息傳播方式以其靈活性成為了最具持久性的傳播手段。這一方面是由于它是人與生俱來(lái)的生物習(xí)性,另一方面也是由于這種傳播方式不必借助任何工具,由此也不會(huì)受到傳媒系統(tǒng)冰冷的理性主義影響。在印刷術(shù)出現(xiàn)之前,所有的顛覆性思想都是通過(guò)這種方式進(jìn)行傳播的,即使在印刷術(shù)出現(xiàn)之后,人們也還是習(xí)慣于選擇這種方式來(lái)傳播某種思想,或聆聽(tīng)某種教誨。事實(shí)上,直到電子媒介橫行的今天,最具說(shuō)服力的思想仍然是通過(guò)口頭語(yǔ)言形成和表達(dá)的,口頭語(yǔ)言仍舊是傳播顛覆性思想的一種靈活而不受控制的方式。因此,“這種靈活而古老的信息傳播方式對(duì)任何既定的秩序都是一個(gè)威脅”。

中世紀(jì)的歐洲僧侶,用在羊皮紙上刻錄下來(lái)的文字,向后世的人們講述了當(dāng)時(shí)由書(shū)法、筆、尺子和羊皮所構(gòu)成的書(shū)寫(xiě)技術(shù)和制作方法,也講述了當(dāng)時(shí)的經(jīng)濟(jì)制度。羊皮紙取自動(dòng)物的皮,這些動(dòng)物的皮必須經(jīng)過(guò)石灰水處理,去除污垢,再烘干,然后用粉筆寫(xiě)上字,再刮掉。而刮的時(shí)間比在書(shū)房書(shū)寫(xiě)的時(shí)間還長(zhǎng)。而且由于這種傳播工具的制作工藝復(fù)雜,也就對(duì)持有者提出了較高的要求,所以當(dāng)時(shí)通過(guò)羊皮紙所傳播的信息或思想都是比較專(zhuān)業(yè)的,僅限于小范圍內(nèi)的傳播,或者說(shuō)僅限于一些文化權(quán)貴,而這些人往往供職于教廷,或貴族和官員的官邸。由于掌握著社會(huì)的集體記憶,那些會(huì)寫(xiě)字的人,有能力獲得羊皮紙的人被社會(huì)賦予了特別的權(quán)力。而那些沒(méi)有能力掌握文字的平民階層只能從教堂的壁畫(huà)上學(xué)習(xí)宗教。于是文字成了統(tǒng)治的工具,并由此成為權(quán)利的工具。

從歷史角度來(lái)說(shuō),我們現(xiàn)代的思想和哲學(xué)植根于印刷媒介。印刷術(shù)的出現(xiàn)。尤其是書(shū)籍的普及,使得個(gè)人思想能夠以更快的速度,在更廣的范圍內(nèi)傳播。這就使得個(gè)人思想不再局限于上流社會(huì),也不再僅僅限于少數(shù)人的專(zhuān)利,而在公共的領(lǐng)域內(nèi)獲得了培養(yǎng)。當(dāng)然,印刷術(shù)最主要的功績(jī)還在

于,它促成了現(xiàn)代學(xué)校的出現(xiàn)和發(fā)展。這樣,全世界的人們都可以加入到瀆寫(xiě)的線性邏輯中來(lái)。在學(xué)校里,更多的人掌握了閱讀的能力,進(jìn)而培養(yǎng)了邏輯思考的能力,這種能力可以培養(yǎng)人們的理性精神,利用理性來(lái)綜合各種感官知識(shí),從而用清晰、有序、嚴(yán)肅的語(yǔ)言來(lái)指導(dǎo)人類(lèi)的行動(dòng)。文化從口語(yǔ)文字向閱讀的轉(zhuǎn)變把教育擴(kuò)展到整個(gè)歐洲,最終建立了現(xiàn)代西方思想。由此,波茲曼認(rèn)為,我們可以給印刷時(shí)代貼上邏輯或線性思考的標(biāo)簽。在某種程度上,具備了個(gè)人思想和邏輯思維才能成為有文化的人,也正是這種個(gè)人思想和邏輯思維才使得文字和書(shū)籍成為傳統(tǒng)意義上文化的代名詞。事實(shí)上,我們對(duì)文化的崇信中就包含了對(duì)與文化有關(guān)的字和字紙的崇敬。解放前,很多城隍廟的門(mén)前都會(huì)有一個(gè)銅爐,叫做“化字爐”,上面用陽(yáng)文鑄著“敬惜字紙”四個(gè)字。這也表現(xiàn)出我們對(duì)文字所代表的文化的崇拜。

電報(bào)于1840年人使用,在此之前信息和思想的傳播方式和速度是與人的流動(dòng)保持同步。但是電報(bào)的出現(xiàn),迅速改變了信息傳播的速度,使得它可以在瞬間完成。于是,人們認(rèn)識(shí)世界的速度越來(lái)越快,但不可避免的是,人們?cè)僖矡o(wú)法像過(guò)去一樣從容地就某條信息的真實(shí)進(jìn)行分析和決斷,因?yàn)檗D(zhuǎn)眼間信息就會(huì)鋪天蓋地。信息由此變成了一種單純依靠速度來(lái)進(jìn)行買(mǎi)賣(mài)的商品,于是,過(guò)去依靠信息來(lái)指導(dǎo)自己行動(dòng)的人們不得不首先要對(duì)信息的價(jià)值進(jìn)行辨別。同時(shí),電報(bào)所帶來(lái)的信息具有支離破碎的特點(diǎn)。信息的存在是需要語(yǔ)境的,而通常我們認(rèn)識(shí)事物也需要相應(yīng)的環(huán)境。但是電報(bào)卻是去語(yǔ)境化的,信息僅僅依靠簡(jiǎn)短的文字來(lái)提供,單獨(dú)的文字排列往往是多義的,這就給人們的認(rèn)識(shí)帶來(lái)了一定的困難。由此,人們一方面要從繁多的信息中挑選有價(jià)值的內(nèi)容,一方面也必須要對(duì)信息的內(nèi)容進(jìn)行準(zhǔn)確的辨別。電報(bào)為人們認(rèn)識(shí)世界提供了更多的信息,同時(shí)也增加了人類(lèi)認(rèn)識(shí)世界的難度。與電報(bào)幾乎同時(shí)出現(xiàn)的攝影術(shù)在某種程度上顛覆了線性排列文字的傳統(tǒng)地位,用圖像將形態(tài)和顏色完全表現(xiàn)出來(lái),剝奪了口語(yǔ)語(yǔ)言和文字的描繪能力,同時(shí)也扼殺了人們給予文字的想象力。圖像在印刷媒介中的大量使用往往擾亂而非促進(jìn)合理的思維,同時(shí)也會(huì)迅速打斷閱讀者的邏輯思維。

在上世紀(jì)20年代,無(wú)線電廣播迅速成為新聞傳播和宣傳活動(dòng)的主導(dǎo)方式。這是向新的非文字系統(tǒng)通信時(shí)代的決定性轉(zhuǎn)變。談到廣播,似乎無(wú)法繞開(kāi)媒介與戰(zhàn)爭(zhēng)的關(guān)系。對(duì)于人類(lèi)有史以來(lái)最大的一場(chǎng)全球浩劫,無(wú)論是經(jīng)歷者,還是后來(lái)者都無(wú)法低估廣播對(duì)那場(chǎng)戰(zhàn)爭(zhēng)的影響。無(wú)數(shù)個(gè)炮火轟隆的時(shí)刻,幾千萬(wàn)人擁擠在收音機(jī)旁全神貫注。這是后來(lái)即使擁躉眾多的電視媒體所無(wú)法超越的奇觀,或許正是戰(zhàn)爭(zhēng)成就了廣播這一媒介傳播。在戰(zhàn)爭(zhēng)中,任何大眾傳媒都會(huì)作為一種政治宣傳的工具,而非消遣娛樂(lè)的手段,正是如此才使得廣播在當(dāng)時(shí)成為具有巨大號(hào)召力的媒體?;蛟S我們可以這樣說(shuō),宗教成就了印刷術(shù),而戰(zhàn)爭(zhēng)則成就了廣播。

無(wú)線電廣播縮短了相互認(rèn)識(shí)的空間距離,它的口頭語(yǔ)言還能滋養(yǎng)口語(yǔ)交流的傳統(tǒng),事實(shí)上,廣播也正是從這一狀況中受益才被人們逐漸接受下來(lái)的。在擺脫非常時(shí)期的影響之后,廣播也開(kāi)始產(chǎn)生形形的觀點(diǎn)。這些觀點(diǎn)為當(dāng)時(shí)的人們認(rèn)識(shí)世界提供了參考。但廣播所提供的信息經(jīng)常在幾種觀點(diǎn)之間搖擺,聽(tīng)眾經(jīng)常會(huì)受到不相干信息的干擾,無(wú)法從轉(zhuǎn)瞬即逝的收聽(tīng)內(nèi)容中發(fā)現(xiàn)真正有價(jià)值的東西,由此聽(tīng)眾獲得井然有序認(rèn)識(shí)的能力逐漸降低,這樣也就不利于形成獨(dú)立的個(gè)人思想。

加拿大學(xué)者德里克?德?凱克霍弗(Derrick De Kerckhove)認(rèn)為,“如果說(shuō)書(shū)籍,尤其是小說(shuō),培育并維持了個(gè)人思想在公共空間中的發(fā)展,而電視卻恰恰相反,將公共思想帶人了個(gè)人的空間?!薄_@主要是由于兩者的信息呈現(xiàn)方式和閱讀方式不同所引起的,書(shū)籍從出現(xiàn)之日起就是在將個(gè)人的思想進(jìn)行傳播,努力顛覆具有同一性的集體思想,而讀者在安靜的環(huán)境中很容易發(fā)展出自己獨(dú)特的想法;同時(shí)它也創(chuàng)造了一個(gè)社區(qū)環(huán)境,形成公共空間,個(gè)人思想可以在這一空間自由交流。但電視卻將適合某一集體的信息帶給個(gè)人,個(gè)人不再是作為個(gè)體出現(xiàn),而僅僅是具有共同需求的某一集體的成員而存在,因?yàn)橛^眾總是在一種群體生活中獲得信息。這樣,盡管閱讀電視信息的空間是私人的,但是信息卻是公共的,而且其中所包含的思想以一種集體的療式進(jìn)行解讀,個(gè)人思考習(xí)慣和思想被壓制。事實(shí)上,電視媒介壓制了印刷媒介所培養(yǎng)起來(lái)的認(rèn)識(shí)論,“已經(jīng)贏得了‘元媒介’的地位――一種不僅決定我們對(duì)世界的認(rèn)識(shí),而且決定我們?cè)鯓诱J(rèn)識(shí)世界的工具”、如果我們?cè)敢鈺簳r(shí)拋卻電視帶給我們的膚淺而虛假的歡樂(lè),愿意從更深刻的角度考察電視的出現(xiàn),我們就會(huì)發(fā)現(xiàn),當(dāng)電視開(kāi)始接管文學(xué)的角色時(shí),公共話(huà)語(yǔ)的重要性、精確性和價(jià)值就開(kāi)始?xì)?,被陷于這種想象、審美和新奇性中,我們的知識(shí)就完全被吸引到了電視轉(zhuǎn)播所傳送的去語(yǔ)境的字節(jié)符號(hào)的信息上。于是人類(lèi)與過(guò)去和未來(lái)的聯(lián)系已經(jīng)滑落到了顯像管中。

基因編輯技術(shù)范文第5篇

關(guān)鍵詞 變壓器;參數(shù);確定;制作;要點(diǎn)

中圖分類(lèi)號(hào)TM4 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A 文章編號(hào) 1674-6708(2012)79-0184-02

輸出變壓器,作為高阻抗功放電路與低阻抗負(fù)載的阻抗變換器件,其主要任務(wù)是完成前后級(jí)的阻抗匹配,和單一頻率的電源變壓器比較,它的頻帶(20Hz~20kHz)要寬得多。其次為了使輸出的音頻信號(hào)在低頻段有較強(qiáng)的沖擊力;在高頻段有很好的穿透力和解析力,要求輸出變壓器一次側(cè)繞組的電感量要足夠大,整個(gè)繞組的匝間分布電容要足夠小。正是由于這些特點(diǎn),要求音頻變壓器從選材、制作工藝、到參數(shù)的確定都與眾不同。

音頻變壓器有直流磁化型和無(wú)直流磁化型,在膽機(jī)功放電路中用得較普遍的還是無(wú)直流磁化型,這種給功放管屏級(jí)供電的變壓器由于上下繞組是對(duì)稱(chēng)的,其線圈中的直流磁通正好抵消,因而屬于無(wú)直流磁化型,下面以推挽輸出無(wú)直流磁化型變壓器為例說(shuō)明各項(xiàng)參數(shù)的確定方法。

如:有一功放電路需要一只音頻變壓器,要求輸出功率為60VA,變壓器一次側(cè)屏極至屏極的阻抗Rp=6000Ω,直流工作電流I=250mA,二次側(cè)的負(fù)載阻抗為4Ω和8Ω,頻率響應(yīng)在50Hz~18kHz范圍內(nèi),效率η=0.8,根據(jù)要求確定變壓器的參數(shù)。

1輸出變壓器一次側(cè)電感量的計(jì)算

為了達(dá)到所要求的低端頻響,要求一次側(cè)線圈的電感量滿(mǎn)足設(shè)定頻率的下限值,可按下面的公式進(jìn)行計(jì)算:

式中:Lp為一次側(cè)的電感量,單位為H;Rp為一次側(cè)的負(fù)載電阻,單位為Ω;fD為設(shè)計(jì)頻率的下限值,單位為HZ;MD為工作于下限頻率時(shí)允許的失真系數(shù),通常取1.4左右。在實(shí)際運(yùn)用中綜合考慮各種因素,可按下面的經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算

2鐵芯截面積的計(jì)算

鐵芯的截面積可通過(guò)下式求得:

式中Sc為鐵芯截面積,單位為cm2 ;Po為輸出功率,單位為VA。代入上面的數(shù)據(jù)得:

3一次側(cè)繞組匝數(shù)的計(jì)算

對(duì)于無(wú)直流磁化型輸出變壓器,其初級(jí)線圈、次級(jí)線圈都可按下式計(jì)算:

式中L為電感量,單位為H; lc為鐵芯磁路的長(zhǎng)度, 通常lc為鐵芯中心舌寬的5.6倍(中心舌寬在鐵芯材料參數(shù)表中可以直接查出,也可以實(shí)際測(cè)量出來(lái));Sc 為鐵芯截面積,單位為cm2;μ為鐵芯導(dǎo)磁率(普通熱軋硅鋼片為400~500,冷軋硅鋼片為800~1000)本例中硅鋼片的導(dǎo)磁率μ取500,如所用鐵芯中心舌寬A取3.5cm , Ic取19cm,將上面的數(shù)據(jù)代入則可以算出一、二側(cè)的數(shù)據(jù)。

4變壓器二次側(cè)繞組匝數(shù)的計(jì)算

其計(jì)算可按如下公式進(jìn)行:

因變壓器的二次側(cè)有4Ω和8Ω兩個(gè)繞組,所以應(yīng)該分別計(jì)算

0Ω~4Ω繞組的匝數(shù)為:

(匝)

0Ω~8Ω繞組的匝數(shù)為:

(匝)

5兩邊繞組線徑的計(jì)算

上面實(shí)例中提供的直流工作電流I=250mA,該電流為兩只功放管的工作電流,由于一次側(cè)變壓器線圈中既有直流又有交流,在計(jì)算導(dǎo)線直徑時(shí),應(yīng)該按照直流分量的平均電流計(jì)算。

I平均

一次側(cè)的導(dǎo)線直徑由下式計(jì)算:

二次側(cè)的導(dǎo)線直徑為:

最后需要說(shuō)明的是上面關(guān)于輸出變壓器的計(jì)算并沒(méi)有考慮所有的因素,在實(shí)際制作中還需要從以下3個(gè)方面把控產(chǎn)品質(zhì)量。

1)鐵芯的選擇

當(dāng)變壓器在音頻范圍內(nèi)工作時(shí),無(wú)論是鐵損還是銅損都比工頻運(yùn)用時(shí)的損耗高出許多,這些損耗將直接導(dǎo)致變壓器的傳輸效率降低,音頻功率損耗加大,輸出音頻功率無(wú)法達(dá)到設(shè)計(jì)要求。所以為了減小功放電路的功率損耗,可從減小變壓器的漏磁通入手,選用窗口截面積與橫截面積之比較小,鐵芯旁柱寬度等于橫截面中心柱寬度,中心柱兩側(cè)空位寬度等于旁柱寬度,且厚度為0.35mm以下的優(yōu)質(zhì)冷軋硅鋼片做鐵芯。

2)一二次側(cè)繞組的繞制

由于推挽功放電路是對(duì)稱(chēng)性的,要求給兩只對(duì)管屏極供電的輸出變壓器的兩個(gè)一次側(cè)繞組也要對(duì)稱(chēng),另外為了提高功放電路的高端頻響,需要變壓器采用分層、分段、疊繞的方式繞制,即:輸出變壓器的一次側(cè)線圈要求以B+為中心端,將一次側(cè)線圈分為P1與P2兩組,每組各分成三段,上下相同,相鄰放置,同方向繞制,將二次側(cè)線圈分為二段夾于一次側(cè)中間。采用這種繞法的好處是各繞組的分布電容呈串聯(lián)連接,結(jié)果會(huì)使分布電容進(jìn)一步減小,有利于提高上限頻率,擴(kuò)展通頻帶。在繞制過(guò)程中,線一定要拉緊,但不一定要像機(jī)器繞制那樣整齊,允許少量亂層。二次側(cè)繞組盡量稀繞,不可像一次側(cè)那樣密繞,不管是一次側(cè)或是二次側(cè)所用的漆包線一定要選用高強(qiáng)度的漆包線 。切不可信手拈來(lái)隨便就用。

3)層間絕緣的處理

輸出變壓器的繞組之間、匝與匝之間具有交直流兩種電位差,疊加后的電壓峰值過(guò)大容易發(fā)生繞組擊穿現(xiàn)象,為了避免這種現(xiàn)象的發(fā)生,層間絕緣是必須做好的工作,通常的做法是每層繞組間墊入一層0.05mm厚的薄膜,如果有時(shí)間可以采用繞一層均勻刷一層快干漆,這樣既可以大大提高絕緣強(qiáng)度,又可以防止上下層導(dǎo)線相互嵌入增大線間電位差造成匝間短路的后果。變壓器繞制完成后應(yīng)進(jìn)行預(yù)先干燥,其目的是驅(qū)除鐵芯、繞組、絕緣材料中的水分,干燥過(guò)程中的溫度以絕緣材料的耐受溫度+10℃為宜,烘干時(shí)間設(shè)置4小時(shí)左右。烘干后待其冷卻到50℃~70℃時(shí)就可以浸漆。在浸漆過(guò)程中應(yīng)充分浸透,等到漆槽中的氣泡停止20min后拿出、滴干余漆后,在70℃~80℃的環(huán)境中慢慢烘干。

總之,只有精雕細(xì)作,踏實(shí)做好每個(gè)環(huán)節(jié),才能得到一件稱(chēng)心如意的產(chǎn)品。

參考文獻(xiàn)

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